維生素E檢測試劑盒的操作步驟:
樣本處理:
1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.2g,加入1mL提取液) 加入提取液,充分勻漿后用提取液定2mL,在漩渦混勻儀上震蕩5min,于25℃, 5000g離心10min, 取上層測定。
2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議1000萬細(xì)胞加 入2mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);在漩 渦混勻儀上震蕩5min,于25℃,5000g離心10min,取上層測定。
3. 血清:取0.2mL,加1.9mL提取液,漩渦儀混勻上震蕩5min,于25℃,5000g離心10min,取上層 測定。
測定操作:
對照管 測定管 樣品(μL) 500 500 試劑一(μL) 100 100 試劑二(μL) 100 試劑三(μL) 100 充分混勻,25℃反應(yīng) 5min 試劑四(μL) 300 300 充分混勻,于 1mL 玻璃比色皿,無水乙醇調(diào)零,測定 530nm 處吸光值,記 為 A 對照管和 A 測定管,△A=A 測定管-A 對照管。
維生素E檢測試劑盒在實驗過程中,能更有效的保持試劑穩(wěn)定,并且容易保存,其操作方法簡單,結(jié)果判定比同類產(chǎn)品更客觀更具優(yōu)勢。如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。
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