測定原理:
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。
使用酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測定試劑盒時的注意事項有:
1.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
2.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
3.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
4.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
5.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
7.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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