一氧化氮(NO)
一氧化氮(NO)是一種極不穩定的生物自由基,分子小,結構簡單,常溫下為氣體,微溶于水,具有脂溶性,可快速透過生物膜擴散,是生物體內重要的信號轉導分子,廣泛分布于生物體內各組織中,特別是神經組織。在機體免疫、循環、呼吸、消化、泌尿、生殖等系統中也起著十分重要的作用。
一氧化氮合成酶(NOS)及其分型
一氧化氮合成酶(NOS)是生物體內催化L-精氨酸合成NO的一類酶,主要存在于血管平滑肌、巨噬細胞、內皮細胞、神經細胞、肝細胞、腎小球膜細胞等各種細胞中。動物體內NOS有3種亞型,分別為神經元型NOS(nNOS)、內皮型NOS(eNOS)、損傷誘導型NOS(iNOS)。這三種亞型在不同的細胞和組織中有不同的表達模式和功能。
nNOS主要存在于神經系統中,在中樞神經系統(CNS)表達的nNOS與生物的學習、記憶等密切相關,外周神經系統(PNS)中nNOS產生的NO作為神經遞質有著調節腸道蠕動、舒張血管的作用。eNOS主要存在于血管內皮細胞、腎小管內皮細胞等,血管內皮細胞eNOS產生的NO可抑制血小板聚集和黏附于血管壁,防止出現血栓,還可通過調控動脈粥樣硬化相關基因的表達,阻止白細胞向血管壁的遷移和黏附,減少血管炎癥,從而預防動脈粥樣硬化。iNOS主要存在于與炎癥反應相關的巨噬細胞、白細胞中,通常在細胞中不表達,但可被細菌脂多糖、細胞因子和其他誘導劑誘導表達,產生大量NO,引起DNA損傷和線粒體呼吸抑制等。
一氧化氮(NO)含量的檢測
NO在生物體內或水溶液中極易氧化生成NO2-和NO3-,可通過檢測NO2-和NO3-的含量間接得到NO含量。常見的檢測方法有化學法與酶法。
化學法是在酸性條件下,NO2-與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產物在550nm處有特征吸收峰,計算可得樣本NO含量。該法操作簡便,用時較短,方便進行大批量樣本檢測。
酶法測定總NO含量是利用硝酸還原酶特異性將NO3-還原成NO2-,再與重氮鹽磺酸胺、萘基乙烯基二胺反應生成有色產物進行計算。該法檢測靈敏度和準確性更高,NO含量較低的樣本可用此法檢測。
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溫馨提示
索萊寶生化試劑盒貨號以“0"、“5"結尾,分別代表兩類反應體系。以“0"結尾的代表試劑盒所用方法為分光光度法(反應體系約1mL),可以用分光光度計進行檢測;以“5"結尾的試劑盒代表所用方法為微量法(反應體系約0.2mL),可以用分光光度計或者酶標儀進行檢測。