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產品名稱:DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料

產品型號:G7140

產品報價:

產品特點:DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料
貨號 :G7140
規格:0.5ml (10000×)
保存:常溫運輸,4℃保存,有效期一年。
注意 :本產品屬于微量核酸檢測試劑,使用時請按照說明書操作。

免費咨詢:010-50973130

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G7140DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料的詳細資料:

DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料

貨號 :G7140

規格:0.5ml (10000×)

保存:常溫運輸,4℃保存,有效期一年。

注意 :本產品屬于微量核酸檢測試劑,使用時請按照說明書操作。

 

產品簡介 :

目前常見的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I (屬于花氰類染料) 雖然毒性比 EB 低、 靈敏度比 EB 高,但由于其化學穩定性差;此外,SYBR Green I 在電泳過程中能在 DNA 分子間移位,很容易使 DNA 條帶模糊和扭曲,電泳清晰度和分辨率下降。所以在實際應用中依然不能有效替代 EB。本產品是同時具有 EB 穩定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料,其特點如下:

1.  低毒。其主要成分未發現對人體有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保護使用者的健康和保護日益惡化的環境。

2.  靈敏。檢測靈敏度跟 EB 相當,能滿足常規核酸電泳實驗要求。

3.  穩定。對光、水和熱的穩定性跟 EB 相當,可加入瓊脂糖凝膠中反復熔化。

4.  無分子間位移現象。不會出現 SYBR 染料常見的條帶模糊和扭曲現象。

5.  使用方法多樣。既可以加入熔化的膠中,也可以電泳后染色,還可用于 PAGE。

6.  跟各種常用的核酸電泳緩沖液(如 SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低。

7.  觀察時不需要任何額外的儀器設備或 UV 光源,可以使用現成的觀察 EB 的 300nm UV。

8.  可用于 RNA 染色(也呈綠色)。

9.  DNA 或 RNA 濃度較高時還可以直接在日光下觀察 (需要將膠放在黑色背景下) 。 由于避免了 UV 對 DNA的傷害,尤其適用于膠回收實驗。

 

使用方法:

電泳中染色:

本方法是將 DNAGREEN 直接加入溶化的凝膠中使用,只適用于瓊脂糖凝膠電泳,不適用于 PAGE。

1.  將 DNAGREEN 直接加入到融化的瓊脂糖凝膠中, 每 100mL 凝膠加 310 uL DNAGREEN, 混合均勻后倒膠。瓊脂糖凝膠中不能含任何其他染料(如 EB 和 SYBR Green I,否則會相互干擾) 。在 100mL 瓊脂糖凝膠中加入 DNAGREEN 的量不要超過 10 uL,否則背景增強。注意:一定要保證瓊脂糖*熔化,尤其是在*次熔化膠的時候,否則未熔化的小顆粒將產生跟染料相同的熒光。

2.  將 DNA 樣品與 DNA 上樣液按比例混合后上樣。注意:一定要使用不含 SDS 等去污劑的上樣液,否則SDS 會跟染料結合,極大地降低靈敏度。

3.  上樣后電泳,電泳參數同常規的電泳。

4.  電泳結束后在 300 nm 左右 的 UV 下觀察。

注意:不要使用波長為 260 nm 或 360 nm 的 UV,否則檢測靈敏度會降低。如果 DNA 或 RNA 濃度較高,還可以直接在日光下直接觀察(需要將膠放在黑色背景下) ,

避免 UV 對 DNA 的傷害,尤其適用于膠回收實驗。

5.  用配置了 520-550 nm 濾光片(一般呈黃色或深黃色)的相機拍照。注意:不要使用與 EB 兼容的紅色濾光片(它能阻擋 520-550 nm 的光) 。如果能再加上能濾去 UV 的濾光片,效果會更好。

6.  后續 Southern、轉膜或 DNA 膠回收實驗按常規操作進行。

 

電泳后染色:

本方法是在電泳后對 DNA 進行染色,適用于瓊脂糖凝膠電泳和 PAGE。但該方法需要單獨的染色處理,染料用量較大,不推薦用于瓊脂糖凝膠的染色。

1.  按照常規方法進行電泳。

2.  用去離子水將 DNAGREEN 稀釋 500 倍后(100 mL 水需要加 0.2 mL DNAGREEN) ,將凝膠放入,室溫下搖晃染色 30 分鐘(對瓊脂糖凝膠)或 15 分鐘(對 PAGE) 。

3.  用水脫色 10-30 分鐘,具體時間需根據背景強弱決定。

注意:電泳后染色液可以反復使用次數。

 

疑難解答: 

Q:本產品可否用于 RNA 染色?

A: 可以,不論 RNA 是在甲醛變性膠中電泳,還是在普通的 SuperBuffer-2、TBE 或 TAE 膠中電泳,RNA染色后在 300nm 下都跟 DNA 一樣呈綠色,

Q:本產品是否可以加入上樣液中進行染色?

A:不行,本產品只能直接加入凝膠中進行染色或電泳后再染色。

Q:為何前端(靠近正極)的 DNA 條帶很淡或根本看不見?

A:跟 EB 一樣,電泳時 DNAGREEN 朝負極方向移動,當前端的 DNA(小片段)進入沒有 DNAGREEN的區域時,已經結合的染料分子會逐漸從 DNA 分子上脫落,所以條帶會變淡或根本看不見。解決辦法之一是縮短電泳時間或電泳后再染色;之二是在每 100 mL 電泳緩沖液中補加 3-5uL 染料。

Q:本產品在哪種緩沖液中效果好?

A:DNAGREEN 染料在不同緩沖液中背景熒光強度不同,從弱到強的順序是:SuperBuffer-2、TBE、TAE。

在背景較強的緩沖液體中,可以適當降低染料的用量,比如 100mL 膠中加 3-5 uL。濃度需要稍做摸索。

Q:用 SYBR 染色的 DNA 在電泳時為何容易發生條帶模糊和扭曲現象?

A:SYBR 染料一般與 DNA 的小溝結合,但在常規電泳條件下該結合并不牢固,染料分子可以在標記的和未

標記的 DNA 分子之間轉移,使 DNA 分子的泳動速度時快(無染料結合時)時慢(有染料結合時) ,發生條帶模糊和扭曲現象。嵌入型染料(如 EB 和本產品)與 DNA 結合牢固,則無此現象。

 

相關產品 :

T1050 5×TBE  緩沖液

T1060 50×TAE  緩沖液

E1020 EB 溶液 (10mg/ml)

A1020 40% 丙烯酰胺( 19:1 )

D1010 6×DNA Lodding Buffer

M1060  D2000 DNA Ladder

PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料)

 

DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料訂購說明:
1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后,將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料運輸說明:
1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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